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马铃薯的种植技术,附组织培养步骤

马铃薯种植技术

一、马铃薯的种植技术

二、马铃薯的组织培养步骤

1、什么是马铃薯的组织培养

(1)马铃薯的组织培养是指,通过无菌操作分离马铃薯体的一部分(外植体explant),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。

(2)主要有原生质体(Protoplast),悬浮细胞,组织(愈伤组织Callus、茎尖分生组织),器官(胚,花药,子房,根和茎的培养)。其中最常见的是愈伤组织培养。

2、马铃薯组织培养的具体步骤

(1)表面灭菌

①冲洗马铃薯材料除去泥土等大的颗粒。

②浸入70-75%乙醇,有利于马铃薯表面的浸湿。

③用5-20%NaClO溶液(加1滴表面活性剂)表面消毒5-10min。

④用无菌水冲洗至少3遍。

⑤与消毒剂接触过的切面在转移到无菌培养基前应切去,因为消毒剂会杀死外露的细胞从而影响营养吸收。

⑥切取外植体,通常为10mm的茎段和直径10mm的叶片部分(太大激素作用减弱,太小则不易成活)。

(2)培养基

①培养基是植物组织生长的物质基础,因此其组成和理化性质都非常重要。

②在离体条件下,植物激素对马铃薯茎段愈伤组织的诱导、分化起着重要作用。

③马铃薯离体组织培养常用的激素有:生长素如2,4-D、IAA、NAA,细胞分裂素如KT、6-BA,还有赤霉素。

④实验中应该根据研究目的选择合适的激素配比,各种激素均有其最适浓度,过高或过低都会影响植株成愈和分化。

⑤培养基的pH值也有重要影响,pH值影响培养基凝固程度和材料吸收营养。培养基渗透压50.7-202.7kPa适合于植物组织生长,太高会抑制其生长和分化。

(3)愈伤组织培养脱毒

①通过植物器官和组织的培养,分化诱导产生愈伤组织,愈伤组织再分化产生芽,长成小植株,可以得到无病毒苗(因为在受感染植株的组织脱分化形成愈伤组织中,细胞不携带病毒或细胞不含病毒)。

③试验表明,愈伤组织培养脱除病毒的效果比茎尖培养成功率高,但愈伤组织培养所产生的植株遗传性状不稳定,在生产中要注意该问题。

(4)环境因素

①光照

马铃薯不同外植体对光暗要求不同。黑暗有助于提高块茎和茎段出愈率,光照可以增加马铃薯茎尖、叶片出愈率和出愈速度。 

②温度

温度影响器官发生的数量和质量。大多数植物在(25±2)℃生长良好。植物组织培养中,一般都采用22-25℃的恒温条件进行外植体培养,马铃薯组织培养过程均在这个温度范围内进行。

③湿度

环境湿度过大会引起霉菌污染,湿度过低虽不会直接影响培养容器内的湿度,但当培养过久或温度过高时培养基会变干,改变培养基各组分的浓度,影响组织正常生长,应及时转接以保证试管苗的水分和营养供应,相对湿度最好保持在70%-80%。

④气体

培养容器内的气体成分影响培养物的生长和分化。若培养容器通透性太好,水分易散失。通透性太差,瓶中产生的有害气体不易扩散。当培养基中氧浓度低于临界水平时,利于形成胚状体,反之,则利于形成根。

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